科研服务

技术简介

Cleavage Under Target & Tagmentation(CUT&Tag 是一种新兴的 DNA- 蛋白质互作研究方法。CUT&Tag 以融合了 Protein A/ G 的转座酶为核心，融合蛋白通过 Protein A/ G 与抗体结合，使得转座酶被栓系在靶位点周围，从而在目的位点附近进行酶切反应，并同时引入二代测序所必需的接头序列，产物 DNA 经过后续提取与 PCR 扩增后得到文库，可直接用于高通量测序。

技术原理

细胞被固定在刀豆蛋白磁珠（ConA  磁珠）表面，然后加入洋地黄皂苷（Digitonin) 透化细胞膜，依次进行一抗、二抗、转座体的孵育及片段化，反应产物经过 DNA 提取、PCR 富集完成二代测序文库的构建。对于人源细胞常规的组蛋白修饰，仅需进行 3 -5Mreads 的测序量就能得到高分辨率的全基因组图谱。

技术优势

▲ 信噪比高     CUT&Tag 有更低的背景，更强的信号。

▲ 分辨率高     相同测序深度，CUT&Tag 获取的 Peak 数高

应用领域

• 组蛋白修饰：   无论是常染色质还是异染色质，都可以利用 CUT&Tag 技术进行探索组蛋白修饰情况。
• 转录因子：   转录因子按照 CUT&Tag 正常实验推荐的细胞量即可进行实验。
• 全基因组结合蛋白：   除了组蛋白和转录因子外，基因组上其他结合蛋白同样适用 CUT&Tag 技术。
• 标签蛋白：   若 DNA 结合蛋白找不到合适的抗体时，可以将靶蛋白和标签核酸序列连接一起，转基因表达。用抗标签抗体进行试验。
• 间接结合蛋白：   有些蛋白并不直接结合 DNA，而是与直接结合 DNA 的蛋白结合，同样可以进行 CUT&Tag 实验。
• R-Loop 结构：  R-Loop 结构为 DNA 和 RNA 杂交链，没有靶蛋白结合。但是有特异性抗体识别，同样可以进行 CUT&Tag 实验。

已验证抗体清单

注意：若所需抗体不在列表内，需提供抗体名称、货号、物种等信息进行评估，且需自行提供。

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